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体外诊断中的核酸提取纯化的方法及原理介绍(2)

2023-03-15 来源:你乐谷
但即便如此,离心柱纯化法仍存在缺点:
高度依赖吸附膜的结合能力;
洗脱不完全导致核酸流失;
无法大量提取核酸。
流程图
3、磁珠法核酸分离技术
携带正电荷的磁珠易于吸附负电荷的核酸,主要用于从人血清或血浆样品中提取DNA 和RNA(例如从血液样本中检测HIV 或HBV 病毒基因组的样品制备)。一般而言,将样品与结合缓冲液和磁珠混合,核酸与磁珠结合后,经过数次洗涤与磁场捕获,洗脱下来的核酸即可通过PCR 或其它特定方法来检测特定的DNA或RNA。磁分离法也是广泛应用于诊断行业,且能实现高通量、自动化的核酸提取方法。
不同类型基因检测均会涉及到核酸的提取和纯化步骤。核酸提取纯化的方法中,液体法和离心柱法均会涉及到有毒有机物的使用,对环境和实验操作者均存在一定的危害。而磁珠法需要相应特殊配制的磁珠缓冲液和特异修饰后的磁珠,从成本和操作方面来分析,均存在成本高且操作步骤繁琐,同时,也限制了自动化的进程和应用的推广。因此,开发一种能快速释放核酸并且对后续基因检测实验无影响核酸快速释放方法成为目前亟待解决的问题。
针对现有技术存在的问题,苏州先达基因(
4、先达基因核酸快速释放技术
DNA释放剂
苏州先达基因DNA释放试剂盒,专用于从各种常见的样品中快速释放恒温荧光扩增的 DNA,具有以下特点:
1. 核酸释放剂可以快速裂解样品,使样品的 DNA 游离在溶液中。无需自备任何试剂,不使用苯酚、氯仿等有毒试剂。
2. 操作简单,只用一步(约 3min)即可得到用于恒温荧光扩增的 DNA 模板,不需要任何离心、抽提等操作步骤。
3. 全过程仅在一个离心管内完成,避免微量样品的损失,且不容易交叉污染,比常用的抽提试剂盒简单,方便。
4. 兼容性广,适用于常见的分子生物学样品,包括细菌、昆虫、各种动物组织、口腔细胞、毛发、组织中的细菌和病毒等。
DNA释放剂使用方法
应用领域:
生命科学研究、分子诊断、动物疫情检测、食品安全检测、疾控/突发传染病检测、精准用药基因检测
RNA快速提取试剂盒
本试剂盒是先达基因为匹配现有的ERA等温扩增技术,着力为实现分子诊断POCT化而自主开发的一款核酸快速提取产品。本产品可在5min之内快速完成对组织、血液、拭子、细胞等不同少量以及微量样品中病毒的RNA提取和纯化。利用本产品提取获得的RNA可直接应用于核酸扩增及检测、体外逆转录、基因克隆、文库构建、杂交等多种生物学实验及研究。
特点:
5分钟内即可快速提取和纯化得到高品质的RNA;
样本要求量低,RNA提取产量可达到25ug;
操作简便,只需5个操作步骤;
不含酚/氯仿等有毒有害试剂。
RNA快速提取流程图
目前核酸分离技术虽然发展迅速,但是均存在一些缺点,例如:酚氯仿抽提法虽然核酸纯度高,但是其主要成分对人体有害,且容易造成环境污染,同时提取过程需要反复抽提,多次换管,步骤繁琐,会造成样本的丢失与污染;磁珠法因提取成本较高,从而限制了广泛应用。
先达基因的试剂用于生物样本病毒DNA提取,样本需求量少、操作简便、无需繁琐的离心、洗脱等步骤,微量核酸释放剂在完全释放核酸的同时,还具有操作简便、使用安全、成低的优点,适合在临床基因检测中推广应用。

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